ACE-aktivitás mérés
Angiotenzin-konvertáló enzim (ACE) aktivitásának meghatározása az ACE-gén inzerció/deléció polimorfizmusának megfelelő referencia tartományok alkalmazásával
Információ külső beküldőknek
A Debreceni Egyetem, Klinikai Központ, Laboratóriumi Medicina Intézetében elérhető az angiotenzin-konvertáló enzim aktivitásának meghatározása.
Az ACE-aktivitás mérés jelentősége
Az angiotenzin-konvertáló enzim (ACE) a renin-angiotenzin-aldoszteron rendszer egyik kulcsenzime, mely az inaktív angiotenzin I-ből a rendszer fő effektor molekuláját, az angiotenzin II-t hozza létre. Az angiotenzin II többek között vazokonstrikciót, aldoszteron szekréciót és sejtproliferációt indukál. A szérum ACE aktivitása az ACE-gén inzerció/deléció (I/D) polimorfizmusa által genetikailag meghatározott. A D/D genotípussal rendelkező egyének ACE aktivitása megközelítőleg másfélszer nagyobb, mint az I/I genotípussal rendelkezőké, az I/D genotípusúaké pedig köztes értékű. Az ACE aktivitásának növekedését figyelték meg granulomatózus betegségekben (pl. szarkoidózisban) és Gaucher-kórban. Az ACE-aktivitás meghatározása segíthet ezen betegségek diagnosztikájában, a betegség aktivitásának megítélésében és az alkalmazott terápia kontrollálásában.
Meghatározás elve, referencia tartományok
Az ACE-aktivitás mérés kettős fluoreszcens festékkel jelölt [Abz-FRK(Dnp)-P] szubsztráttal, fluoreszcens kinetikus esszével történik. Az ACE két aktív centruma a szubsztrátot ugyanolyan hatékonysággal bontja.
Referencia tartomány ismeretlen genotípus esetén: 4,85 – 13,79 U/l
Az ACE I/D polimorfizmus kimutatására polimeráz láncreakciót és agaróz gél-elektroforézist használunk, a kapott eredményt allél-specifikus PCR-rel erősítjük meg. Az I/D genotípust figyelembe vevő referencia tartományok elkészítéséhez 201 személy (II n= 39, ID n= 90, DD n= 72) ACE-aktivitás és genotípus adatát használtuk fel.
Referencia tartományok:
- I/I genotípus: 3,76 – 11,25 U/l
- I/D genotípus: 5,22 – 11,59 U/l
- D/D genotípus: 7,19 – 14,84 U/l
Vizsgálatkérés, mintatípus, eredményközlés
Az ACE-aktivitás mérés önmagában és ACE I/D polimorfizmus meghatározásával együtt is kérhető. A „kémia” kérőlap letölthető a www.labmed.hu weboldalról a „diagnosztika/vizsgálatkérő lapok/kémia” menüpontból.
Minta ACE-aktivitás méréshez:
1 cső „natív” perifériás vér (sárga kupakos géles cső, vagy piros kupakos natív cső) levétele szükséges, melyből szérumot kell szeparálni (0,5-1 óra alvadást követően a cső centrifugálása 1500-2500g-vel, 15 percig, 25°C-on, majd a felülúszó leszívása új csőbe). A szükséges szérum mennyisége legalább 1 ml.
FIGYELEM!
- A szemmel látható hemolízis zavarja a meghatározást, alulmérést okoz, ezért ilyen esetekben még beküldés előtt új mintavétel javasolt!
- A beteg ACE-gátló kezelése jelentősen csökkenti a szérum ACE-aktivitását!
Minta I/D genotípus meghatározásához:
1 cső citráttal vagy EDTA-val alvadásgátolt vér. A minta primer csőben beküldhető, további mintakezelést nem igényel (közvetlenül fagyasztható is).
Minták beküldésénél figyelembe kell venni a szérum minta stabilitását:
- nem szeparált natív vér: <4 óra
- szeparált szérum 25°C-on: <1 nap
- szeparált szérum +4°C-on: <3 nap
- szeparált szérum -20°C-on: >1 év
- szeparált szérum -70°C-on: >5 év
A mintákat a kitöltött, lepecsételt kérőlappal együtt az alábbi címre kell eljuttatni:
- Debreceni Egyetem, Klinikai Központ
- Laboratóriumi Medicina Intézet
- Mintaátvevő részleg
- 4032 Debrecen, Nagyerdei körút 98.
Az ACE-aktivitás mérésének pontértéke: 537 pont, eredményközlés heti egy alkalommal történik. Az ACE I/D polimorfizmus kimutatásának pontértéke 5326 (DNS izolálással együtt 9251) pont, az eredményeket két- háromhetente közöljük.
Javasoljuk a külső beküldőknek, hogy a vizsgálatok elvégzéséhez szükséges mintákat egyszerre küldjék el, függetlenül a kért vizsgálatok számától (ACE-aktivitás önmagában vagy genotípus meghatározással). A beteg ACE-aktivitás-értékének birtokában minden esetben konzultálunk a beküldő kezelőorvossal a genotipizálás szükségességéről vagy szükségtelenségéről!
A vizsgálattal kapcsolatban felmerülő kérdések esetén kérjük, forduljanak dr. Fagyas Miklós orvosi laboratóriumi diagnosztika szakorvoshoz, telefon: +36-52-411-717 / 55404 mellék, e-mail: fagyasmiklos@med.unideb.hu.
További információ a méréssel kapcsolatban: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29425104